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當前的非洲豬瘟已經變成弱毒株的田間多樣性,我們該如何應對?特別是中小散養豬場

2023-04-07 14:35:38      點擊:

從2021年10月開始,非洲豬瘟的流行又出現了一些新的特性,新特性主要表現有:

(1)從2021年10月開始,東北、華北等北方平原地區,新發生疫情的母豬場急速增多;發病豬群的臨床癥狀輕微,檢測的陽性樣品Ct值較高。

(2)采用原來的凈化處置方法,凈化陽性場所需時間明顯變長。陽性場處置轉陰之后,經過15-25天,又會轉陽,甚至多次反復。

(3)有的場沒發現異常豬,就莫名檢測到ASFV核酸陽性。有輕微臨床癥狀的豬樣本,檢測發現病毒含量很高,Ct值可低至24。確診發現是野毒!

(4)檢測發現Ct值在25左右,很多豬沒有癥狀,也沒有死亡。低Ct值豬只,剔除后多天仍未見死亡。

(5)在首次檢出陽性1周后,豬舍灰塵中經常檢出病毒核酸。

針對以上非洲豬瘟出現新的問題,閆老師從非洲豬瘟的病原學特點、變異情況、感染方式、臨床癥狀、檢測手段等方面提出一些疑問,并從實驗研究數據和田間觀察到的一些數據及分析中,得出了一些結論。

新流行非瘟疑難問題及分析

1是否存在低劑量感染造成輕微癥狀 ,異常豬難以發現?

非洲豬瘟的典型癥狀必須依靠對陰性豬進行攻毒試驗來觀察確定,攻毒后癥狀包括厭食、發熱、躺臥、皮膚出血/紫紺、關節腫脹、呼吸困難、腹瀉/血便等。在生產和臨床上,每次出現的癥狀會有差異。

對陰性豬的攻毒實驗觀察結果顯示:不同攻毒劑量下,病毒血癥開始出現的時間即是臨床癥狀出現的時間節點;攻毒劑量不影響病毒血癥出現的時間和臨床癥狀出現的時間。病毒血癥與發燒等臨床癥狀同時出現。


2生產條件下“檢測+清除”,是否會導致大量不間斷的交叉污染?

這個疑慮從之前的“全面檢測+清除”的經驗來看,可以打消,因為并未造成大面積的豬群感染及規模縮減。迅速全檢風險很小,不會造成大的污染。非洲豬瘟在群內傳播很慢,個別豬感染后,在群內往往只感染臨近豬。如果只采樣檢測異常豬不能完全消除傳染源。在7天潛伏期內,再次檢測基本可消除隱形感染豬。

補充一下個人觀點,在異常場線全面采樣的操作細節中,也有一些值得注意的事項。口鼻拭子個體采樣,需要逐頭更換工具及手套,采完一頭消毒后再采下一頭。避免做保定豬只采血等容易造成交叉污染的操作,可以采用尾根采血的方式。

3是否ASF病毒出現了很大變化?

ASFV全基因組長度約170-193 kbp,基因組中段為125kb的保守段,其中就有編碼P72蛋白的B646L基因。P72、P54、P30蛋白均與病毒侵入細胞有關。基因組兩端為多變的多基因家族(MGF),MGF區的突變、缺失是病毒毒力致弱的基礎。CD2v是由EP402R決定的44個氨基酸,CD2v與宿主CD2v相似,與紅細胞吸附感染細胞有關。

基于高通量基因組測定新技術,對非洲豬瘟病毒的毒株流行情況,有了新的認識。2021年10月首次檢出野毒的田間自然變異株,有些毒株的毒力明顯降低。存在著高毒力野毒和自然變異弱毒并存的現象。在難以處理的豬場陽性生產線,ASFV毒株存在明顯的MGF段的大段缺失+多處基因突變。

根據張桂紅研究室/國家ASF南方中心的接樣檢測數據發現,傳統野毒、人為基因缺失毒株、自然缺失毒株、嵌合毒株都有檢出。由于自然變異/缺失株的出現,通過傳統的鑒別檢測試劑盒來排除野毒或疫苗毒株、以及進行分型(I/II)的方法,已經沒有意義。

同時,可以認識到:

(1)自然缺失毒力大為減弱,感染豬臨床無異常;

(2)“常規的異常豬”檢測手段,難以及時發現豬群已經感染。

(3)僅僅剔除異常豬不能快速及時凈化。


4是否采樣方法/樣品不對,導致難以發現抗原陽性豬?

通過弱毒場線欄位表面環境采樣與血清采樣的檢測結果比較發現,弱毒場線欄位表面環境檢測特異性高,敏感性低(陰性相符的特異性為95%,陽性相符的敏感性為25%)。為提高弱毒檢出率,采用兩次全群采血間篩查,可有效判斷豬只是否處于陰性狀態。血樣仍是最適合的檢測樣本。

5是否感染豬存在間歇性散毒,導致陽性豬有時成了陰性?

臨床檢測數據發現:(1)弱毒感染豬血清持續陽性,但鼻拭子、肛拭子和咽拭子出現間歇性排毒情況,可以說明豬只是陽性但是咽拭子檢測不到。(2)同居豬的血清檢出率較低,但是鼻拭子、咽拭子與攻毒豬也出現同樣的病毒檢出時間雙峰,其原因可能是感染豬排毒時同居豬在攝入病毒。

弱毒的臨床癥狀非常輕微,幾乎所有樣品中都存在間歇性排毒。單一樣品、一次全檢不一定能檢出,因為每次全群檢測時陽性豬不一定正在散毒。發現弱毒感染的場線,首次采樣最好“咽拭子+血液”雙來源,同時一個潛伏期內檢測2次。

傳統野毒與多毒力基因缺失的野毒株的感染,處置方法完全不同。發現陽性感染后,應盡快鑒定毒株類型,可大大節約檢測與清除的資源,決定凈化效果。

6其他國家的是否也發現弱毒株?有基因變異嗎?什么特點?

其他國家也有報道發現ASFV弱毒株,在波羅的海地區的愛沙尼亞,發現的弱毒株,其5’端MGF區存在缺失,3’端存在反轉。使用發現的弱毒株,攻毒12頭小型豬,5頭家豬,5頭野豬。結果,75%的小型豬和所有家豬均在出現急性癥狀后,存活了。但是所有野豬17天內陸續死亡。

弱毒株攻毒后,檢測口咽拭子、肛拭子qPCR陽性出現的時間晚,持續時間短。

也有研究報道,在格魯吉亞出現了新的、低毒力的毒株,這使得被動檢測發現感染豬,變得更加困難。


總結

(1)2021年下半年開始,已發現多種非洲豬瘟田間毒株的基因組中,毒力基因出現多處缺失,致病性已經變異、變弱,防控形勢正在發生重大變化。不再是“高致死力野毒+人工缺失弱毒”并列,而是已經出現多種、多基因自然缺失的弱毒株,高致死力的野毒已經不再常見。

(2)各種受控試驗和在我國的田間觀察均發現,無論是強野毒、人工(單/雙/多)缺失弱毒,還是自然大段缺失的弱毒,豬群均無法與之共存。弱毒感染豬,經過更長時間,均會出現嚴重的ASFV發病癥狀。

(3)通過“全群檢測+精準清除”,均有成功凈化的范例。“全群檢測+精準清除”成功的關鍵是,確診后24h內完成全群檢測+離群。每晚一天都會付出超大代價。

(4)需盡快改進的方法:①盡早發現感染的快速方法;②快速全群檢測的方法;③快速無污染將感染豬/接觸豬隔離或離群的方法。

(5)中期看,有效預防、控制ASF,仍將是養豬業盈虧/存亡的不二法門


防控非瘟當前直接有效方法是中和體內的病毒,使其包裹病毒細胞,阻斷非瘟病毒DNA的復制,從而在體內達到共生的環境,這時候以中草藥特別是發酵中草藥類形成干擾素就起到了至關重要的作用。非瘟病毒無法殺死,這也是目前非常有效的防控方法。

疑似非瘟在各地再現豬場損失大,可通過“拔牙”+中草藥進行凈化操作技術分享

非洲豬瘟暴發4年來,從未遠去,不少養豬人中招了。甚至規模場也不例外,尤其是復養場左發發,右發發,基本不會消停。規模豬場防非瘟如此之難,我們散養戶,更不要輕視。豬場不要讓外人隨便進來,自己也不要經常外出。生物安全要筑牢。當前以慢性非洲豬瘟為主:

慢性非洲豬瘟的臨床癥狀

中度到重度關節腫脹,常伴隨皮膚變紅,凸起和壞死

中毒到重度關節腫脹,常伴隨皮膚變紅,凸起和壞死,紫紺

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非洲豬瘟防控,首先是嚴格的生物安全措施,必須想到一切可能進入豬場的病毒來源,真正做到將非洲豬瘟拒之門外。其次,按中醫“正”氣存內,邪不可干”、“邪之所湊,其氣必虛”的預防理論,就是強化豬群天然抗病能力。依據中醫“君臣佐使”處方原則,其防制非瘟(包括其它感染性疾病)的中藥組方可以參考:

每1000克采用黃芪100克、大青葉50克、香附50克、白術50克、枳殼50克、檳榔50克、茯苓50克、澤瀉50克、水牛角50克、地黃25克、白芍50克、側柏葉50克、丹皮50克、梔子50克、金銀花100克、巴戟天50克、大黃25克、甘草50克、板藍根25克和貫眾25克原生中草藥并進行超微粉粉碎而成。

正常豬的血管是鮮紅的,感染非瘟病毒后耳朵上的血管會發生變化,出現下面情況要對豬進行“拔牙”具體介紹如下:

↓看耳朵血管由鮮紅發展到暗紅,說明已經感染

疑似非瘟在各地再現豬場損失大,可通過“拔牙”+中草藥進行凈化

↓由暗紅變得發青,說明距離發病時間很短了,大約一周

疑似非瘟在各地再現豬場損失大,可通過“拔牙”+中草藥進行凈化

↓耳朵變厚,身上臥著紅,大部分不吃料或開始減料了

疑似非瘟在各地再現豬場損失大,可通過“拔牙”+中草藥進行凈化

↓耳朵變厚,身上臥著紅,大部分不吃料或開始減料了

疑似非瘟在各地再現豬場損失大,可通過“拔牙”+中草藥進行凈化


一、自動供料系統在規模豬場、飼喂干料的豬場的運用

未發生感染時,每噸飼料中長期添加500-1000克“御瘟湯”,并且每噸飼料中另外添加20公斤“多功能生物發酵活菌肽”,并且養殖欄舍中少使用或者不使用化學消毒劑,改為使用“高效持久生物除臭消毒劑”,前3天每天1次之后每3-7天1次,所有吃料的豬群(含母豬各階段都可以使用)長期使用(此方案每頭豬每月成本約3-6元,母豬10元左右)。

如果已經發生疑似感染首先要對不吃料、減料、耳朵血管鼓起且發暗皮膚發紫、流產、死胎、表現異常的豬要快速隔離或淘汰(不能有心軟舍不得的心態,一周內都持續這樣做),全場豬快速補打豬圓環病毒2型滅活疫苗(已經進行免疫的不需要補打),同時馬上在每噸飼料中添加5公斤“御瘟湯”(最高可以每噸飼料中添加10公斤,效果更直觀),并且每噸飼料中另外添加40公斤“多功能生物發酵活菌肽”,連續使用14-19天。在所有養殖欄舍中少使用或者不使用化學消毒劑,改為使用“高效持久生物除臭消毒劑”,前3天每天1次之后每3天1次(此方案14-19天每頭豬所需成本約6-15元,母豬25元左右),恢復正常后按照未感染時操作即可。

如果豬場已經發生混合感染(同時感染非瘟、豬瘟、藍耳等),適當增加其它藥物,能夠很快控制并逐漸凈化下來(下同),綜合下來每頭豬的成本大約在15-45元。

二、在飼喂干濕料、粥料豬場上的運用(最推薦的方法)

“御瘟湯”發酵成為中草藥菌水的方法:1.5-2公斤“御瘟湯”+1包500克的“99多功能飼料發酵劑”+750克~1公斤“多糖性復合菌種營養基”(或1公斤紅糖+10公斤全價飼料)+100公斤清水混合在非金屬容器中簡單密封發酵72小時以上后使用(在半個月內使用完效果更好,且要持續密封保存,否則時間一長可能變質不能使用)。

未發生感染時,每噸飼料中添加100公斤“御瘟湯“中草藥菌水(母豬、公豬各階段均可使用,但不超量使用或者減半使用),并且將“御瘟湯“中草藥菌水兌水30倍對養殖欄舍代替化學消毒劑進行消毒(前3天每天1次之后每3-7天1次)長期使用(此方案每頭豬每月成本約1.5-3元,母豬6元左右,每噸飼料運用成本不高于120元)。

發生疑似感染的豬場首先要對不吃料、減料、耳朵血管鼓起且發暗皮膚發紫、流產、死胎、表現異常的豬要快速隔離或淘汰(不能有心軟舍不得的心態,一周內都持續這樣做),全場豬快速補打豬圓環病毒2型滅活疫苗(已經進行免疫的不需要補打),同時在每噸飼料中添加50-100公斤“御瘟湯“中草藥菌水,同時每噸飼料中再添加未發酵的“御瘟湯”原藥粉5公斤(最高可以每噸飼料中添加10公斤,效果更直觀),連續14-19天,并且將“御瘟湯”中草藥菌水兌水30倍對養殖欄舍代替化學消毒劑進行消毒(前3天每天1次之后每3-7天1次)恢復正常后按照未感染時運用方法長期使用(此14-19天每頭豬所需成本約3-12元,母豬約20元)。

三、穩定下來后的日常管理

1.長期在飼料中添加發酵完成的“御瘟湯”或者飼料中添加含中草藥的“多功能生物發酵活菌肽”,只要是吃料的豬都不能停止使用。母豬各階段都可以使用但切記不要對母豬過量使用,否則可能會對少數母豬影響發情等。

2.長期每3天進行1次發酵完成的“御瘟湯”兌水30倍或者采用“高效持久生物除臭消毒劑”激活后兌水30-50倍對養殖欄舍帶豬消毒。

3.不使用潲水飼料,嚴防收豬人投毒(將非洲豬瘟病死豬投放到你的豬場以達到讓你快速低價賣豬給他的目的)。這是特別要注意的事情——防止被人投毒(就是有些收豬人將病死豬組織投到你豬場的飲水池中、料槽中,甚至通過無人機來投毒,達到低價收購你豬場豬的目的),這種投毒是強毒模式,即使采取本方案有可能會導致部分感染。點擊了解→豬場防控非洲豬瘟要嚴防“炒豬團伙”向自己豬場投毒

4.健全的免疫:一定要對所有豬進行當前已經有疫苗必要完整的免疫,特別是圓環、豬瘟、偽狂犬等。

5.經常除四害,這點非常重要!因為四害中的蒼蠅和老鼠是導致非洲豬瘟從外到內、內部快速傳播的主要媒介。飼料中每隔一段時間添加環丙氨嗪(也就是“滅蠅凈”)連續使用15天,對蒼蠅使用各種蒼蠅藥能夠很快解決;老鼠可以通過使用特效鼠藥特別是“追蹤粉”、“追蹤膏”等新型鼠藥能夠在短時間內將老鼠基本滅絕,每2-3個月使用1次即可。當然,如果有條件,所有養殖欄舍設立防蚊蠅網、擋鼠板那就更好。

6.豬場內不要養殖其它動物。

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